摘要：探讨背景在慢性乙型肝炎抗病毒治疗越来越被重视的今天,什么是治疗的入选条件?什么是评价疗效的指标?什么是停药的信号?最可靠的指标是HBVDNA。探讨表明,患者的HBVDNA水平为慢性乙型肝炎急性加重时发生失代偿的独立预测因素。关于治疗指征现在国内均遵照2010年更新版《慢性乙型肝炎防治指南》。但是由于历史的理由,相当一部分病人在过去的治疗中,并未按照此指南规范用药,普遍有着过度用药、利用指证不严格等现象,导致应答不佳、出现YMDD变异等不良后果。临床医生在接诊此类患者时感到非常困难,一是明确应答不佳的理由,主要是YMDD变异株的检测,二是根据是否有着YMDD变异给予针对性的补救。实际上,采取什么检测手段,既能够及时准确发现应答不佳,又能够减少患者的经济负担,可能正是努力的方向。目前有着的检测HBVDNA及YMDD变异的手段非常多,可以说各有利弊。由此,如何选择一种合适的策略值得探讨。探讨目的把应答不佳的一部分病例进行两种策略的检测,即用PCR-反相点杂交法和PCR荧光法,分别检测’YIDD、YVDD、rtLl80M、rtM204V、rtM204I等指标,然后进行比较,对检测结果灵敏性、误差、费用、用时、便捷性比较,判断两种策略的优劣。探讨YMDD变异占应答不佳的比例,并把基线值包括HBVDNA、ALT水平进行浅析,以而找出内在联系。探讨策略(1)病例选择和标本收集：病例选择的标准为：所有病例均诊断为慢性乙型肝炎,HBVDNA阳性,接受单独利用拉米夫定24周以上,24周时复查HBVDNA虽然较基线值降低1log10IU/mL但未降到检测下限。本论文收集的160例慢性HBV感染者均为在安徽医科大学第一附属医院感染科及淮南市第一人民医院感染科2008年1月——2011年12月住院部或门诊部确诊的且接受拉米夫定单药治疗后应答不佳的慢性HBV感染者。(2)病毒DNA模板制备：采取经典的蛋白酶K消化-酚-氯仿策略。(3)随机抽取38例分别利用PCR荧光法和PCR反向点杂交法进行YMDD变异株和变异位点检测。然后对数据进行浅析,比较两种检测策略的优缺点,以而得出结论,哪种策略更加灵敏、便捷,适用于基层医院进行YMDD变异的检测。(4)将160例患者在接受拉米夫定治疗前的基线HBVDNA和ALT值做分组浅析,找出它们内在的联系。结果(1)随机抽取38例YMDD变异病例分别利用PCR荧光法和PCR反向点杂交法进行基因型、YMDD变异株和变异位点检测,发现基因B型和C型发生YMDD变异的几率无显著差别。发现主要变异位点是rtL180M+rtM204V,计20例(52.63%)。(2)用荧光PCR法检测发现有35例阳性,灵敏度92.11%。而用PCR-反相点杂交法检测发现34例为rtM204V/I阳性,灵敏度89.47%。把结果进行统计学浅析,发现二者相比,差别性不显著(P0.05)。(3)PCR反向点杂交法耗时较多、花费较大、需要仪器设备多、操作复杂、技术水平要求高、难以普遍开展,而且只能以检测位点显色与否进行定性浅析,不能提供定量方面的参考。PCR荧光法不仅能检测突变类型,而且能够精确定量突变毒株在病毒群体中的比例,除了相似的灵敏性、特异性、耗时少以外,有突出的优势,且质控方便,所以适合对于检测精密度要求不是太高的临床实验室利用。(4)在160例应答不佳患者中,有62例(38.75%)只有野生株有着、并未发现变异株,而37例(23.13%)YMDD野生株和变异株均未检出。确定为YMDD变异的病例61例(38.13%),其中检出YVDD变异株26例(16.25%),检出YIDD变异株22例(13.75%),YVDD和YIDD同时有着5例(3.13%),变异株和野生株混合感染8例(5%)。(5)随着时间的延长,变异几率显著增加。把160例病例的基线资料做一个比较浅析,发现变异率与基线ALT水平及HBVDNA水平有一定联系,即基线HBVDNA水平越高、ALT越低,发生YMDD变异几率越高。结论虽然拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的效果被无数试验证明是有效安全的,但随着疗程的延长,变异不足变得越来越严重。如果打算尽早确定YMDD变异以便采取积极干预措施,准确的检测手段必不可少。在许多检测策略中,PCR荧光法无疑是一种省时、便捷、价廉、准确性高、特异性高的检测策略,更适合基层临床利用。但是,由于本实验样本量小,所以与PCR反向点杂交法相比,准确性没有显著性差别。我们将扩大样本量,对二者的优缺点做进一步探讨。关键词：乙型肝炎病毒论文拉米夫定论文YMDD变异论文PCR反向点杂交法论文PCR荧光法论文
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中英文缩略词表5-6
中文摘要6-9
Abstract9-13
1 引言13-14
2 材料和策略14-20
2.1 探讨对象14
2.2 主要仪器、试剂及试剂配制14-17
2.3 探讨策略17-20
2.4 统计学浅析20
3 结果20-28
3.1 两种检测策略结果比较21-26
3.2 单用拉米夫定治疗后出现应答不佳患者浅析26-28
4 讨论28-32
4.1 PCR荧光法和PCR反向点杂交法的比较28-30
4.2 单用拉米夫定出现应答不佳的思索30-32
5 小结32
6 革新性32-33
参考文献33-36
综述36-48
参考文献43-48
试议乙型肝炎拉米夫定治疗慢性乙型肝炎YMDD变异检测及大专
更新时间：2024-04-02
作者：用户投稿
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