摘要：口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis, O)是一种慢性的、复杂的口腔黏膜疾病。主要体现为上皮下组织的炎症反应和黏膜下组织的进行性纤维化。咀嚼槟榔是O的主要致病因素。O是一种口腔的癌前病变。O的癌变率高达7%-13%。O的发病及癌变机制也已成国内外学者共同关注的焦点。本课题组的胡延佳用AffymetrixU133A2.0芯片构建O颊黏膜组织的基因表达谱,并对部分差别表达基因进行了验证。然而,仅在基因组水平探讨O发生进展历程中DNA或是mRNA的变化不能完全阐明O发病历程中的分子机制。为了寻找新的O发病分子标记物,本探讨采取蛋白质组学策略对正常人和O患者的口腔颊黏膜组织中差别表达的蛋白质进行分离和鉴定,对鉴定出来的差别蛋白质进行生物信息学浅析,并采取Western blotting和免疫组织化学的策略对部分差别蛋白质进行半定量和定性验证。(一)蛋白质组学筛选口腔黏膜下纤维性变病例差别蛋白质目的：准确筛选正常人和O患者口腔颊黏膜组织的差别表达蛋白质,并对其进行生物信息学浅析。策略：收集正常人(NBM组)和O患者(O组)的口腔颊黏膜组织标本各10例,分组混合,形成1对标本。对其进行二维电泳分离(2-DE),经图像浅析后找出差别表达的蛋白质斑点,并进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MADLDI-TOF-MS)浅析鉴定,并对质谱鉴定出的蛋白质进行生物信息学浅析。结果：得到的NBM组和O组的2-DE图谱,经过软件浅析得到表达差别在2倍以上的蛋白质斑点48个。采取MADLDI-TOF-MS对差别蛋白质斑点进行鉴定,最终得到33个差别蛋白质。其中,在O组中表达上调的有22个,表达下调的有11个。结论：比较蛋白质组学技术能有效地鉴定O差别表达蛋白质,能为寻找O发病分子标记物的提供参考数据。(二)部分口腔黏膜下纤维性变病例差别蛋白质的验证探讨目的：对前期鉴定的5个差别蛋白质进行半定量和定性验证探讨并探讨其临床作用。策略：收集NBM组和O组颊黏膜组织标本,用于Western blotting浅析的标本各20例,用于免疫组织化学浅析的标本NBM组20例,O组60例。利用Western blotting和免疫组织化学的策略对5个差别蛋白质(prohibitin、peroxiredonxin2、translationally controlled tumor proteinn calumenin及cellular retinoic acid binding protein1)在NBM组和O组中的表达进行检测。结果：Western blotting结果显示O组中的prohibitin、 peroxiredonxin2及translationally controlled tumor protein的表达显著上调,calumenin及cellular retinoic acid-binding protein1的表达显著下调。免疫组织化学结果显示O组中prohibiting peroxiredonxin2及translationally controlled tumor protein的阳性表达率分别为70.0%、71.7%、81.7%,显著高于NBM组,calumenin及cellular retinoic acid binding protein1在O组的阳性表达率分别为8.3%、0%,显著低于NBM组。结论：5个差别蛋白质的Western blotting和免疫组织化学结果与前期蛋白质组学结果相一致。3个上调蛋白质和2个下调蛋白质的差别表达能够有助于解释O发病历程中某些病理生理学转变,有望成为潜在的O发病的分子标志物。关键词：口腔黏膜下纤维性变论文蛋白质组学论文差别蛋白质论文生物信息学论文
本论文由www.808so.com摘要5-7
ABSTRACT7-11
縮略说明11-13
技术路线13-14
第一章 蛋白质组学筛选口腔黏膜下纤维性变病例差别蛋白质14-41
1.1 前言14-18
1.2 材料与策略18-24
1.3 结果24-32
1.4 讨论32-40
1.5 结论40-41
第二章 部分口腔黏膜下纤维性变病例差别蛋白质的验证探讨41-66
2.1 前言41
2.2 材料与策略41-47
2.3 结果47-56
2.4 讨论56-65
2.5 结论65-66
附录66-74
参考文献74-88
综述88-99
参考文献95-99
致谢99-101
攻读博士学位期间主要的成果101-102
种慢性的、复杂的口腔黏膜疾病。主要体现为上皮下组织的炎症反应和黏膜下组织的进行性纤维化。咀嚼槟榔是O的主要致病因素。O是一种口腔的癌前病变。O的癌变率高达7%-13%。O的发病及癌变机制也已成国内外学者共同关注的焦点。本课题组的胡延佳用AffymetrixU133A2.0芯片构建O颊黏膜组织的基因表达谱,并对部分差别表 WWw.808so.com 808论文查重
试析蛋白质口腔黏膜下纤维性变病例蛋白质组学
更新时间：2024-03-15
作者：用户投稿
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