1001-0769（2014）06-0060-02
摘 要：从20多个养鸡场的发病鸡中分离出可疑菌株，经常规策略培养、纯化、镜检及生理生化鉴定，分离鉴定出 18 株鸡致病性大肠杆菌（ED1、ED2、ED3、ED4、ED5、SD1、SD2、SD3、SD4、WD1、WD2、WD3、WD4、ND1、ND2、ND3、ND4、ND5），有 12 株分离株被鉴定出血清型，血清型主要有 O78、O35、O36、O1、O2、O5、O18。其中 O78 共有 4 株，占 33.3 %，O35 共有 3 株，占 25 %，药敏试验结果表明，分离的大肠杆菌对氟苯尼考，丁胺卡那霉素，新霉素，庆大霉素敏感，对环丙沙星，强力霉素，诺氟沙星中度敏感，而对红霉素，青霉素，链霉素产生了耐药性。
关键词：鸡大肠杆菌病；血清型；分离；鉴定；药敏试验
1 前言
大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌（Escherchia Coli，E. Coli）的某些血清型所引起的一类传染病的总称。但它也是一个非常重要的胚胎病[1]。正常的人类和动物的肠道内寄居绝大多数菌。然而，一些大肠杆菌在漫长的进化过程中，细菌会侵入肠外组织，器官或血液毒性，可引起人类和动物细菌性病。
2 材料与策略
2.1 材料
2.1.1 病料来源
病料来源于山西地区各养殖场及养殖户送检的病、死鸡，临床剖检有典型心包炎、肝周炎、气囊炎或卵黄性腹膜炎，疑似为大肠杆菌病。
2.2 策略
2.2.1 大肠杆菌的分离与培养
无菌取病料接种于普通营养琼脂培养基，37 ℃恒温培养24 h后观察菌落的形态。取中等大小、圆形隆起、光滑湿润、边缘整齐的菌落，直接划线接种于麦康凯琼脂平板、依红美兰琼脂平板和血琼脂平板，37 ℃培养24 h。置4 ℃冰箱环境保存备用。
2.2.2 生化试验
选取在伊红美蓝琼脂上生长出的带金属光泽的黑色菌落，选取在麦康凯琼脂上长出的砖红色菌落进行生化试验。作糖发酵试验、吲哚试验、M.R试验、构椽酸盐利用试验、V-P试验、三糖铁试验，在37 ℃培养24～48 h之后观察变化。
2.2.3 药敏试验
用药敏片进行实验操作：用酒精灯火焰把接种环灭菌，然后接种环挑取一定量的细菌培养物，将细菌涂布到平皿培养基上，涂布的时候用划线的方式[6]。
判定标准见表1。
3 结果与分析
3.1大肠杆菌的分离
在无菌条件下采取病料，接种到培养基，37 ℃培养 24 h 后，普通肉汤呈均匀混浊，试管底部有淡白色粘稠沉淀，轻轻摇晃呈云雾状散开，并有臭粪味。在营养琼脂平板上，为圆形微凸起，表面中等大小，光滑湿润，浅灰色半透明菌落，在血液琼脂上出现菌落边缘整齐，并有隆起的灰白色，菌落较大，多数不溶血。在麦康凯琼脂平板上形成菌落中等大小表面光滑湿润呈现粉红色。在伊红美蓝琼脂平板上形成菌落带有金属光泽呈现紫黑色。
3.2.1 染色镜检结果
病死鸡心、肝组织及培养物涂片染色镜检可见大多数分散排列，偶尔有 2～3个连在一起，两端钝圆，两端浓染的革兰氏阴性短杆菌。
3.2.2 生化试验结果
分离到的 18 株菌，各菌均对大多数糖类产酸产气，如葡萄糖、甘露糖、缓慢发酵蔗糖果糖、乳糖、麦芽糖、，MR 试验阳性，三糖铁底层产酸，V-P 试验阴性，尿素酶试验阴性产生靛基质（表2）。
3.2.4 药敏试验结果（抑菌圈直径平均值，单位：mm）
由表 3 可以看出：分离的大肠杆菌对氟苯尼考、丁胺卡那霉素、新霉素、庆大霉素敏感，对环丙沙星、强力霉素、诺氟沙星中度敏感，而对红霉素、青霉素链霉素产生了耐药。
5 结论
药敏试验结果表明，分离的大肠杆菌对氟苯尼考，丁胺卡那霉素，新霉素，庆大霉素敏感，对环丙沙星，强力霉素，诺氟沙星中度敏感，而对红霉素，青霉素，链霉素产生了耐药。
参考文献：（6篇，略）
□□ WWw.808so.com 808论文查重
浅议大肠杆菌分离与药敏鉴定
更新时间：2024-01-17
作者：用户投稿
本站原创
本站原创
点赞:28568 浏览:132416