摘要：背景：鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是中国南方常见的一种头颈部恶性肿瘤，其恶性程度高，具有强大的侵袭转移能力，且发病部位隐蔽，早期诊断难。畸胎瘤细胞源性生长因子（PC cell-derivedgrowth factor，PCDGF）又名progranupn，acrogranin，属于生长因子家族:颗粒蛋白(granupn，GRN)中的一员，其在多种肿瘤中高表达，如乳腺癌[2][3]，卵巢癌[4]，食管鳞状细胞癌[5]，非小细胞肺癌[6]，多发性骨髓细胞瘤[7]等，参与肿瘤的发生、增殖、浸润、转移。由此沉默肿瘤细胞中PCDGF表达有助于防治肿瘤的增殖转移。RNAi是一种抑制特定基因产物表达的有效策略，是由双链RNA（dsRNA）介导的特异性降解相应序列的mRNA，导致靶基因的沉默[8]。本探讨采取RNA干扰技术，沉默PCDGF表达，探讨其对鼻咽癌细胞株HNE-1生物学行为的影响，以期为鼻咽癌的诊断与治疗提供实验室依据。目的：探讨畸胎瘤细胞源性生长因子（PC cell-derived growthfactor，PCDGF）在人鼻咽癌中的表达，并探讨其表达与患者临床病理特点之间的联系。构建针对PCDGF特异性的小干扰RNA（alpnterferirng RNA，siRNA），探讨其对鼻咽癌HNE-1细胞增殖的影响。策略：采取免疫组织化学的策略检测53例鼻咽癌，28例鼻咽慢性炎症组织中PCDGF蛋白的表达情况，并结合患者的临床病理资料对结果进行统计浅析；同时采取荧光免疫细胞化学法检测人鼻咽癌细胞株HNE-1细胞PCDGF表达。根据PCDGF基因设计合成两条siRNA，利用ppofectamineTM2000转染鼻咽癌HNE-1细胞，并在荧光显微镜下检测转染效率。通过real-time PCR、Western blot检测转染后细胞PCDGFmRNA和蛋白表达，采取MTT检测转染后细胞的生长增殖情况，FCM法检测细胞周期分布。结果：53例鼻咽癌组织中PCDGF阳性表达率为82.02%（44/53），28例鼻咽部慢性炎症组织中阳性率为17.86%（5/28），两组间差别有统计学作用（P0.01）。鼻咽癌组织中PCDGF的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及病理分期密切相关（P0.05），而与性别无关（P＞0.05）。2条重组质粒均能特异性的抑制PCDGF mRNA和蛋白的表达，其中siRNA-1的沉默效率最高。转染48h后，HNE-1细胞中PCDGF mRNA和蛋白表达水平分别下调59.3%和57.6%，细胞增殖抑制率为（37.07±12.4）%，siRNA-1组G0/G1期细胞增加, S期细胞数量显著减少（P0.05），细胞周期被阻滞于G1期。结论：特异性siRNA能够有效沉默PCDGF基因表达，并显著抑制鼻咽癌HNE-1细胞增殖。关键词：鼻咽肿瘤论文畸胎瘤细胞源性生长因子论文RNA干扰论文
本论文由www.808so.com英汉缩略语名词对照5-7
中文摘要7-9
ABSTRACT9-12
前言12-14
第一部分 PCDGF 在鼻咽癌组织及 HNE-1 细胞株的表达14-21
1 材料与策略14-17
2 实验结果17-19
3 讨论19-21
第二部分 RNAi 沉默 PCDGF 基因的表达对 HNE-1 细胞株增殖的影响21-35
1 材料与策略21-30
2 实验结果30-33
3 讨论33-35
全文总结35-36
参考文献36-38
附图38-40
文献综述40-47
参考文献44-47
致谢47-48
硕士期间发表的文章48-49
WWw.808so.com 808论文查重
对于鼻咽鼻咽癌PCDGF表达及siRNA对HNE
更新时间：2024-01-31
作者：用户投稿
本站原创
本站原创
点赞:26224 浏览:119700